Morphofunctional analysis of fibroblast-like synoviocytes in human rheumatoid arthritis and mouse collagen-induced arthritis

Abstract Background Fibroblast-like synoviocytes (FLS) play a prominent role in rheumatoid synovitis and degradation of the extracellular matrix through the production of inflammatory cytokines and metalloproteinases (MMPs). Since animal models are frequently used for elucidating the disease mechanism and therapeutic development, it is relevant to study the ultrastructural characteristics and functional responses in human and mouse FLS. The objective of the study was to analyze ultrastructural characteristics, Interleukin-6 (IL-6) and Metalloproteinase-3 (MMP-3) production and the activation of intracellular pathways in Fibroblast like synoviocytes (FLS) cultures obtained from patients with rheumatoid arthritis (RA) and from mice with collagen-induced arthritis (CIA). Methods FLSs were obtained from RA patients (RA-FLSs) (n = 8) and mice with CIA (CIA-FLSs) (n = 4). Morphology was assessed by transmission and scanning electron microscopy. IL-6 and MMP-3 production was measured by ELISA, and activation of intracellular signaling pathways (NF-κB and MAPK: p-ERK1/2, p-P38 and p-JNK) was measured by Western blotting in cultures of RA-FLSs and CIA-FLSs stimulated with tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) and IL-1β. Results RA-FLS and CIA-FLS cultures exhibited rich cytoplasm, rough endoplasmic reticula and prominent and well- developed Golgi complexes. Transmission electron microscopy demonstrated the presence of lamellar bodies, which are cytoplasmic structures related to surfactant production, in FLSs from both sources. Increased levels of pinocytosis and numbers of pinocytotic vesicles were observed in RA-FLSs (p < 0.05). Basal production of MMP-3 and IL-6 was present in RA-FLSs and CIA-FLSs. Regarding the production of MMP-3 and IL-6 and the activation of signaling pathways, the present study demonstrated a lower response to IL-1β by CIA-FLSs than by RA-FLSs. Conclusion This study provides a comprehensive understanding of the biology of RA-FLS and CIA-FLS. The differences and similarities in ultrastructural morphology and important inflammatory cytokines shown, contribute to future in vitro studies using RA-FLS and CIA-FLS, in addition, they indicate that the adoption of CIA-FLS for studies should take careful and be well designed, since they do not completely resemble human diseases.

Avaliação Psicométrica da Prova de Título de Especialista em Cardiologia da Sociedade Brasileira de Cardiologia / Psychometric Evaluation of the Cardiology Certification Exam of the Brazilian Society of Cardiology

Resumo Fundamento A Sociedade Brasileira de Cardiologia promove anualmente a prova para obtenção do título de especialista em Cardiologia, sendo a Comissão Julgadora do Título de Especialista em Cardiologia responsável pela sua organização e aplicação. A análise psicométrica dos itens de uma prova, por meio da Teoria de Resposta ao Item (TRI) pode fornecer informações robustas e contribuir para o aprimoramento contínuo dessa avaliação. Objetivos Avaliar as propriedades psicométricas da prova do Título de Especialista em Cardiologia no ano de 2019, em relação aos parâmetros da TRI. Métodos Estudo observacional, com a análise psicométrica das 120 questões da prova realizada por 1120 (mil cento e vinte) candidatos para a obtenção do título de especialista em Cardiologia, no ano de 2019. Resultados A análise da prova pela TRI mostrou 32,2% dos itens com poder de discriminação "alto" ou "muito alto", 49,2% dos itens categorizados como "fácil" ou "muito fácil" e 41,5% apresentavam alta probabilidade de acerto ao acaso . Foram identificados 69 itens com problemas em relação aos parâmetros da TRI e, portanto, com baixo poder de avaliar a proficiência do candidato. Conclusões A análise psicométrica da prova de título de Especialista em Cardiologia pela TRI demonstrou um alto percentual de questões fáceis, com cerca de dois terços dos itens com alta probabilidade de acerto ao acaso. Esses dados poderão desencadear uma série de discussões e propostas para a construção das futuras provas em cardiologia.

Abstract Background The Cardiology Certification Exam is issued annually by the Brazilian Cardiology Society and set and applied by the Judging Committee for the Cardiologist Title (CJTEC). The psychometric analysis of the exam items using the Item Response Theory (IRT) may provide robust data that can help in the continuous improvement of this instrument. Objectives To evaluate the psychometric properties of the 2019 Cardiology Certification Exam in relation to the IR parameters. Methods This was an observational study, with psychometric analysis of the 120 questions of the exam taken by 1,120 candidates for the title of Cardiologist in 2019. Results The IRT analysis revealed that 32.2% of the items had a "high" or "very high" discriminating power, 49.2% were categorized as "easy" or "very easy", and 41.5% showed a high probability of a correct guessing. Sixty-nine deficient items in terms of the IRT parameters were identified, which were then considered poorly effective in evaluating the candidate's ability. Conclusions The psychometric analysis of the 2019 Cardiology Certification Exam by the IRT revealed a high percentage of easy questions, with nearly two thirds of the items with a high probability of correct guessing. These data may serve as a basis for a series of discussions and proposals for the elaboration of future certificate exams in Cardiology.

Clinical Frailty Scale em idosos atendidos no Serviço Hospitalar de Emergência: a fragilidade basal é um bom preditor de mortalidade em 90 dias? / Clinical Frailty Scale in older adults admitted at Emergency Department: is baseline frailty a good predictor of Ninety-Day Mortality?

Resumo Objetivo Avaliar a capacidade da Clinical Frailty Scale (CFS) em predizer a mortalidade em até 90 dias e outros desfechos desfavoráveis em idosos admitidos em um Serviço Hospitalar de Emergência (SHE). Método Estudo de coorte prospectivo que incluiu idosos admitidos e que permaneceram por pelo menos uma noite no SHE de um hospital público terciário. O grau de fragilidade basal foi avaliado através da CFS e sua pontuação, o preditor estudado, por meio da curva Receiver Operator Characteristics (ROC). Analisou-se como desfecho primário a mortalidade em 90 dias. Considerou-se como desfechos secundários: mortalidade em 180 dias, declínio funcional, readmissão no SHE, reinternação e necessidade de atenção domiciliar. Resultados 206 participantes foram incluídos. Dos 127 idosos frágeis, 40 (31,5%) faleceram até o 90º dia comparado a 5 (6,3%) do grupo não frágil (p<0,001). Após ajuste para variáveis demográficas e clínicas, a fragilidade manteve-se no modelo como um preditor independente de mortalidade em 90 dias da admissão. A acurácia obtida pela curva ROC (AUROC) para predição de mortalidade em 90 dias foi de 0,81. Para mortalidade em 180 dias foi 0,80; para necessidade de atenção domiciliar, 0,77; e para reinternação, 0,65. Para os demais desfechos estudados, a acurácia não foi significativa. Conclusão A fragilidade basal medida pela CFS é um bom preditor de mortalidade em 90 e 180 dias e de necessidade de atenção domiciliar em idosos admitidos no SHE. Sua aplicação nesse cenário pode auxiliar na tomada de decisões clínicas.

Abstract Objective To evaluate the ability of the Clinical Frailty Scale (CFS) to predict 90-day mortality and other poor outcomes in older adults admitted at a Hospital Emergency Department (ED). Method This is a prospective cohort study including older adults admitted at ED of a Public Hospital who spent at least one night in it. The degree of baseline frailty was assessed through the CFS, and its score was the predictor studied, through the Receiver Operator Characteristics (ROC) curve analysis. We analyzed 90-day mortality as a primary outcome. The following outcomes were considered as secondary ones: mortality, functional decline, readmittance to ED, readmission and need for home care. Results 206 participants were included. Of the 127 frail older adults, 40 (31.5%) died before the 90th day compared to 5 (6.3%) in the non-frail group (p<0.001). After adjustment for demographic and clinical variables, frailty remained in the model as an independent predictor of 90-day mortality. The accuracy obtained by the ROC curve (AUROC) for predicting 90-day mortality was 0.81. For 180-day mortality, 0.80, for the need for home care, 0.77 for readmission, 0.65. For the other outcomes studied, the accuracy was not significant. Conclusion Baseline frailty measured by the CFS is a good predictor of 90 and 180-day mortality and needing for home care in older adults admitted to ED. Its application in this setting might help clinical decision-making.

Methotrexate use, not interleukin 33, is associated with lower carotid intima-media thickness in patients with rheumatoid arthritis

Abstract Background: Rheumatoid arthritis is a risk factor for early mortality due to cardiovascular disease. Interleukin-33 appears to protect against the development of atherosclerosis. The purpose of this study was to investigate the relationship between serum levels of interleukin-33 and its soluble receptor with the presence of subclinical carotid atherosclerosis in rheumatoid arthritis patients. Methods: Rheumatoid arthritis patients without atherosclerotic disease were subjected to clinical and laboratory assessments, including carotid ultrasound. Interleukin-33 and its soluble receptor serum levels were measured by ELISA. Results: 102 patients were included. The prevalence of carotid plaques was 23.5% and the median intima-media thickness was 0.7 mm. The median interleukin-33 and its soluble receptor concentration was 69.1 and 469.8 pg/ml. No association was found between serum interleukin-33 or its soluble receptor and intima-media thickness or plaque occurrence. Each 0.1 mm increase of intima-media thickness raised the odds of plaque occurrence by 5.3-fold, and each additional year of rheumatoid arthritis duration increased the odds of plaque occurrence by 6%. Each additional year in patients age and each one-point increase in the Framingham Risk Score were associated with a 0.004 mm and 0.012 mm increase in intima-media thickness. Methotrexate use was associated with a 0.07 mm reduction in intima-media thickness. Conclusions: Interleukin-33 and its soluble receptor were not associated with subclinical atherosclerosis. Traditional risk factors for atherosclerosis and rheumatoid arthritis duration were associated with intima-media thickness and plaque occurrence; methotrexate use was associated with a lower intima-media thickness.

Avaliação da interleucina 3 como marcador prognóstico na sepse / Role of interleukin-3 as a prognostic marker in septic patients

RESUMO Objetivo: Avaliar a acurácia dos níveis de interleucina 3 para predizer prognóstico em pacientes sépticos. Métodos: Conduzimos uma coorte prospectiva que incluiu pacientes adultos internados em unidade de terapia intensiva, que apresentassem sepse ou choque séptico iniciados há até 48 horas. Mediram-se os níveis séricos de interleucina 3 quando da inclusão (dia 1) e nos dias 3 e 7. O desfecho primário analisado foi a mortalidade hospitalar por qualquer causa. Resultados: Foram incluídos 120 pacientes. Os níveis séricos de interleucina 3 dosados à inclusão foram significativamente mais elevados em pacientes que faleceram em comparação aos que sobreviveram à internação hospitalar (91,2pg/mL versus 36pg/mL; p = 0,024). Em modelo de sobrevivência de Cox com inclusão de idade e valores sequenciais de SOFA, os níveis de interleucina 3 mensurados na inclusão mantiveram-se independentemente associados à mortalidade hospitalar (HR 1,032; IC95% 1,010 - 1,055; p = 0,005). Em curva Característica de Operação do Receptor construída para investigação adicional da acurácia da interleucina 3 na predição do prognóstico, encontrou-se área sob a curva de 0,62 (IC95% 0,51 - 0,73; p = 0,024) para mortalidade hospitalar. Valores iniciais de interleucina 3 acima de 127,5pg/mL mostraram-se significativamente associados à mortalidade hospitalar (p = 0,019; OR = 2,97; IC95% 1,27 - 6,97; p = 0,019), entretanto com baixo desempenho (especificidade de 82%, sensibilidade de 39%, valor preditivo positivo de 53%, valor preditivo negativo de 72%, razão de verossimilhança negativa de 0,73 e razão de verossimilhança positiva de 2,16). Conclusão: Níveis elevados de interleucina 3 mostraram-se independentemente associados à mortalidade hospitalar em pacientes sépticos, entretanto com baixo desempenho clínico.

ABSTRACT Objective: To evaluate the accuracy of IL-3 to predict the outcome of septic patients. Methods: Prospective cohort study with adult patients in an intensive care unit with sepsis or septic shock diagnosed within the previous 48 hours. Circulating IL-3 levels were measured upon inclusion (day 1) and on days 3 and 7. The primary outcome was hospital mortality. Results: One hundred and twenty patients were included. Serum levels of IL-3 on day 1 were significantly higher among patients who died than among patients who survived the hospital stay (91.2pg/mL versus 36pg/mL, p = 0.024). In a Cox survival model considering the IL-3 levels at inclusion, age and sequential SOFA, IL-3 values remained independently associated with mortality (HR 1.032; 95%CI 1.010 - 1.055; p = 0.005). An receiver operating characteristic curve was built to further investigate the accuracy of IL-3, with an area under the curve of 0.62 (95%CI 0.51 - 0.73; p = 0.024) for hospital mortality. A cutoff initial IL-3 value above 127.5pg/mL was associated with hospital mortality (OR 2.97; 95%CI: 1.27 - 6.97; p = 0.0019) but with a low performance (82% for specificity, 39% for sensibility, 53% for the positive predictive value, 72% for the negative predictive value, 0.73 for the negative likelihood and 2.16 for the positive likelihood ratio). Conclusion: Higher levels of IL-3 are shown to be independently associated with hospital mortality in septic patients but with poor clinical performance.

Evaluation of the Bleeding Intensity of Patients Anticoagulated with Warfarin or Dabigatran Undergoing Dental Procedures / Avaliação da Intensidade de Sangramento de Procedimentos Odontológicos em Pacientes Anticoagulados com Varfarina ou Dabigatrana

Abstract Background: Thrombotic disorders remain one of the leading causes of death in the Western world. Dabigatran appeared as an alternative to warfarin for anticoagulation in the treatment of atrial fibrillation (AF). The risk associated with bleeding due to its use has been documented in several randomized clinical trials, but no large study has examined in detail the risk of bleeding during dental extraction and other dental procedures involving bleeding. Objective: To compare the intensity of bleeding in individuals taking dabigatran or vitamin K antagonist (warfarin) and undergoing dental procedures. Methods: Prospective, single-center, controlled study with one single observer. Patients diagnosed with nonvalvular AF, on warfarin or dabigatran, cared for at a cardiology referral center, and requiring single or multiple dental extractions, were evaluated up to seven days post-extraction. The following outcomes were assessed: bleeding time between the beginning and the end of suture and complete hemostasis; bleeding before the procedure, after 24 hours, 48 hours, 7 days, during and after suture removal (late); p<0.05 was defined as of statistical relevance. Results: We evaluated 37 individuals, 25 in the warfarin group and 12 in the dabigatran group. Age, sex, weight, height, blood pressure, color, schooling, family income and comorbidities were similar between the two groups. Regarding bleeding after 24 hours of the procedure, no one in the dabigatran group had bleeding, whereas 32% in the warfarin group had documented bleeding (p = 0.028). The other variables analyzed did not differ between the groups. Conclusions: This study suggests that, regarding dental extraction, there is no statistically significant difference in the intensity of bleeding of patients taking dabigatran as compared to those taking warfarin. Bleeding 24 hours after the procedure was less frequent among patients on dabigatran.

Resumo Fundamento: Distúrbios trombóticos permanecem como uma das principais causas de morte no mundo ocidental. A dabigatrana surgiu como alternativa à varfarina para a anticoagulação no tratamento da fibrilação atrial (FA). O risco associado a eventos hemorrágicos com a sua utilização foi documentado em vários ensaios clínicos randomizados, mas nenhum grande estudo analisou detalhadamente o risco de hemorragia durante a extração dentária e em outros procedimentos odontológicos que envolvam sangramentos. Objetivo: Em indivíduos submetidos a procedimentos odontológicos, avaliar a intensidade de sangramento com o uso de dabigatrana em comparação ao uso de anticoagulante oral antagonista da vitamina K (varfarina). Métodos: Estudo prospectivo, controlado, unicêntrico, observador único. Pacientes com diagnóstico de FA não valvar atendidos em um centro de referência em cardiologia e com indicação de anticoagulação que necessitavam de tratamento odontológico para exodontia única ou múltipla, estando em uso de varfarina ou dabigatrana e avaliados até sete dias pós-exodontia. Foram avaliados os efeitos sobre: tempo de sangramento entre o início e o fim da sutura e hemostasia completa; sangramento antes do procedimento, após 24 e 48 horas, 7 dias, durante e após a remoção da sutura (tardio), sendo considerado como estatisticamente significativo valor de p < 0,05. Resultados: Foram avaliados 37 indivíduos, sendo 25 no grupo varfarina e 12 no dabigatrana. Idade, sexo, peso, altura, pressão arterial, cor, escolaridade, renda familiar e comorbidades foram semelhantes nos dois grupos. Em relação ao sangramento 24 horas após o procedimento, ninguém do grupo dabigatrana apresentou sangramento, que esteve presente em 32% do grupo varfarina (p = 0,028). Não houve diferenças entre os grupos em relação às outras variáveis analisadas. Conclusões: Os dados deste estudo permitem sugerir que, em indivíduos submetidos a procedimento odontológico de exodontia, não há diferença estatisticamente significante na intensidade de sangramento em uso de dabigatrana em comparação ao uso de varfarina. Há uma menor frequência de sangramento 24 horas após o procedimento nos indivíduos em uso de dabigatrana.

Azo Dye Mineralization by Phanerochaete Chysosporium in a Sequencing Bath Reactor

ABSTRACT The mineralization of the azo dye congo red by the fungi Phanerochaete chrysosporium was studied in two sequential batch bioreactors (R1 and R2), operated in cycles of 48 h (step I) and 24 h (step II). In step I, glucose concentration was 1 g.L-1 in both reactors and in step II, 1 g.L-1 of glucose was maintained in R1, but R2 received no addition of glucose. In step I, the average dye removal efficiencies were 76 ± 29 % (R1) and 53 ± 15% (R2), while in step II the averages recorded for dye removal for R1 and R2 were 84 ± 15 and 70 ± 28%, respectively. The rates of dye removal were 0.04 h-1 in R1 and 0.03 h-1 in R2 in step I. Higher rates were obtained in step II, 0,07 h-1 and 0,02 h-1 for R1 and R2, respectively. The highest dye removal occurred in R1 and, in R2, the residual dye was further removed. Laccase was the oxidised at higher amount, in step I was 54 μmol.min-1 for R1 and 38 μmolmin-1 for R2. The proposed treatment system was very effective in removing the azo dye, however the mineralization may not be complete and some by-products may have been formed, according to spectrofotometric analysis, were the peak corresponding to benzene, 220 nm, persisted.

Omega-3 fatty acids, inflammatory status and biochemical markers of patients with systemic lupus erythematosus: a pilot study / Ácidos graxos ômega-3, estado inflamatório e marcadores bioquímicos de pacientes com lúpus eritematoso sistêmico: estudo piloto

Abstract Background: Studies have shown that omega-3 fatty acids reduce the concentrations of eicosanoids, cytokines, chemokines, C-reactive protein (CRP) and other inflammatory mediators. Objective: To investigate the effects of omega-3 fatty acids on circulating levels of inflammatory mediators and biochemical markers in women with systemic lupus erythematosus (SLE). Methods: Experimental clinical study (clinical trial: NCT02524795); 49 women with SLE (ACR1982/1997) were randomized: 22 to the omega-3 group (daily intake of 1080 mg EPA + 200 mg DHA, for 12 weeks) and 27 to the control group. The inflammatory mediators and biochemical markers at T0 and T1 in omega-3 group were compared using Wilcoxon test. U-Mann-Whitney test was used to compare variations of measured variables [ΔV = pre-treatment (T0) − post-treatment (T1) concentrations] between groups. p < 0.05 was considered significant. Results: The median (interquartile range - IQR) of age was 37 (29-48) years old, of disease duration was 7 (4-13) years, and of SLEDAI-2K was 1 (0-2). The median (IQR) of variation in CRP levels between the two groups showed a decrease in omega-3 group while there was an increase in control group (p = 0.008). The serum concentrations of IL-6 and IL-10, leptin and adiponectin did not change after a 12 week treatment. Conclusions: Supplementation with omega-3 had no impact on serum concentrations of IL-6, IL-10, leptin and adiponectin in women with SLE and low disease activity. There was a significant decrease of CRP levels as well as evidence that omega-3 may impact total and LDL-cholesterol.

Resumo Introdução: Estudos têm mostrado que os ácidos graxos ômega-3 reduzem as concentrações de eicosanoides, citocinas, quimiocinas, proteína C-reativa (PCR) e outros mediadores inflamatórios. Objetivo: Investigar os efeitos dos ácidos graxos ômega-3 sobre os níveis circulantes de mediadores inflamatórios e marcadores bioquímicos em mulheres com lúpus eritematoso sistêmico (LES). Métodos: Ensaio clínico randomizado (ensaio clínico: NCT02524795); randomizaram-se 49 mulheres com LES (ACR1982/1997): 22 para o grupo ômega-3 (dose diária de 1.080 mg de EPA + 200 mg de DHA durante 12 semanas) e 27 para o grupo controle. Os mediadores inflamatórios e marcadores bioquímicos em T0 e T1 no grupo ômega-3 foram comparados pelo teste de Wilcoxon. O teste U de Mann-Whitney foi usado para comparar variações das variáveis mensuradas [ΔV = concentrações pré-tratamento (T0) menos concentrações pós-tratamento (T1)] entre os grupos. Um p < 0,05 foi considerado significativo. Resultados: A mediana (intervalo interquartil-IIQ) da idade foi de 37 anos (29-48), a duração da doença foi de sete anos (4-13) anos e o Systemic Lupus Disease Activity Index (Sledai-2 K) foi de 1 (0-2). A mediana (IIQ) da variação nos níveis de PCR entre os dois grupos mostrou um decréscimo no grupo ômega-3, enquanto houve um aumento no grupo controle (p = 0,008). As concentrações séricas de IL-6 e IL-10, leptina e adiponectina não se alteraram após um tratamento de 12 semanas. Conclusões: A suplementação de ômega-3 não teve impacto sobre as concentrações séricas de IL-6, IL-10, leptina e adiponectina em mulheres com LES e baixa atividade da doença. Houve uma diminuição significativa nos níveis de PCR, bem como evidências de que o ômega-3 pode impactar sobre o colesterol total e LDL.

Which is the best cutoff of body mass index to identify obesity in female patients with rheumatoid arthritis? A study using dual energy X-ray absorptiometry body composition / Qual o melhor ponto de corte de índice de massa corporal para diagnosticar a obesidade em mulheres com artrite reumatoide? Um estudo que usa a composição corporal pela absorciometria com raios X de dupla energia

ABSTRACT Introduction: Standard anthropometric measures used to diagnose obesity in the general population may not have the same performance in patients with rheumatoid arthritis. Objective: To determine cutoff points for body mass index (BMI) and waist circumference (WC) for detecting obesity in women with rheumatoid arthritis (RA) by comparing these standard anthropometric measures to a dual-energy X-ray absorptiometry (DXA)-based obesity criterion. Patients and method: Adult female patients with more than six months of diagnosis of RA underwent clinical evaluation, with anthropometric measures and body composition with DXA. Results: Eighty two patients were included, mean age 55 ± 10.7 years. The diagnosis of obesity in the sample was about 31.7% by BMI, 86.6% by WC and 59.8% by DXA. Considering DXA as golden standard, cutoff points were identified for anthropometric measures to better approximate DXA estimates of percent body fat: for BMI value ≥ 25 kg/m2 was the best for definition of obesity in female patients with RA, with sensitivity of 80% and specificity of 60%. For WC, with 80% of sensitivity and 35% of specificity, the best value to detect obesity was 86 cm. Conclusion: A large percentage of patients were obese. The traditional cutoff points used for obesity were not suitable for our sample. For this female population with established RA, BMI cutoff point of 25 kg/m2 and WC cutoff point of 86 cm were the most appropriate to detect obesity.

RESUMO Introdução: Medidas antropométricas universalmente usadas para diagnosticar obesidade na população geral podem não apresentar a mesma performance em pacientes com artrite reumatoide. Objetivos: Determinar pontos de corte do índice de massa corporal (IMC) e da circunferência de cintura (CC) para detecção de obesidade em mulheres com artrite reumatoide (AR) por meio da comparação dessas medidas antropométricas habituais com os índices de adiposidade obtidos pela densitometria óssea por dupla emissão de raios X (DXA). Pacientes e método: Mulheres adultas com mais de seis meses de diagnóstico de AR foram submetidas a avaliação clínica com medidas antropométricas e à DXA com exame da composição corporal. Resultados: Foram incluídas 82 pacientes, média de 55± 10,7 anos. O diagnóstico de obesidade na amostra foi de 31,7% pelo IMC, 86,6% pela circunferência de cintura e 59,8% pela DXA. Considerando a DXA o padrão-ouro, o valor de IMC acima de 25 kg/m2 foi o mais adequado para definição de obesidade nas pacientes com AR, apresentou sensibilidade de 80% e especificidade de 60%. Da mesma forma, para a CC, com 80% de sensibilidade e de 35% de especificidade, o valor encontrado foi de 86 cm para se detectar a obesidade. Conclusão: Foi elevado o porcentual de pacientes obesas. Os pontos de corte tradicionalmente usados para obesidade não foram adequados para nossa amostra. Para essa população de pacientes femininas com diagnóstico de AR, o ponto de corte de 25 kg/m2 para IMC e de 86 cm para CC foi o mais adequado para definir obesidade.

Perfil de citocinas em recém-nascidos prematuros utilizando amostras de sangue coletadas em papel filtro: correlação com desfechos clínicos desfavoráveis / Cytokines in preterm newborns using blood samples collected on filter paper: correlation with unfavorable clinical outcomes

INTRODUÇÃO: A identificação precoce de citocinas pode favorecer a condução clínica e adoção de medidas preventivas na população neonatal. OBJETIVO: Avaliar os níveis séricos de Interleucinas (IL) 2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, Interferon gama (IFN-γ), Fator de Necrose Tumoral alfa (TNF-α) e Fator Estimulador de Colônias de Granulócitos e Mastócitos (GM-CSF) nas primeiras três horas de vida de recém-nascidos prematuros através de coleta de sangue em papel filtro. MÉTODOS: Estudo analítico observacional prospectivo desenvolvido com 34 recém-nascidos prematuros com idade gestacional entre 28 e 32 semanas. As dosagens foram feitas com 10, 60 e 180 minutos de vida em papel filtro. Utilizado o reagente Bio-Plex ProT Human Cytokine Standard 8 plex, Group I BIO-RAD e as leituras realizadas com Luminex 100. RESULTADOS: Houve associação entre sepse e a presença de IFN-γ e TNF-α com 10, 60 e 180 minutos de vida. A associação entre sepse e a presença de IL-6 foi observada com 180 minutos de vida. Níveis reduzidos de GM-CSF na primeira hora de vida foram relacionados à hipotermia (p=0,005) à admissão na unidade neonatal. CONCLUSÃO: A detecção dos níveis de citocinas em papel filtro é viável nas primeiras horas de vida de recém-nascidos prematuros. As vantagens são a facilidade de coleta, armazenamento, transporte e utilização de pequenos volumes. O IFN-γ e TNF-α e IL-6 podem ser considerados marcadores para o desenvolvimento de sepse nessa população. A redução dos níveis de GM-CSF em pacientes hipotérmicos favorecendo quadros de neutropenia aponta para a importância da prevenção da hipotermia. (AU)

Introduction: Early identification of cytokines may favor clinical management and the adoption of preventive measures. Objective: This study aims to evaluate the serum levels of IL-2, IL-6, IL-8, IL- 10, Interferon gamma (IFN-γ), Tumor Necrosis Factor alpha (TNF-α) and Stimulating Factor of Granulocyte and Mast Cell Colonies (GMCSF) in the first three hours of life of preterm newborns through blood collection on filter paper. Methods: Prospective observational analytical study developed with 34 preterm infants with gestational age between 28 and 32 weeks. Measurements were made at 10, 60 and 180 minutes of life on filter paper. Used Bio-Plex Pro T Human Cytokine Standard 8 plex reagent, Group I BIO-RAD and readings performed through the Luminex 100. Results: There was an association between sepsis and the presence of IFN-γ and TNF-α at 10, 60 and 180 minutes of life. Association between sepsis and the presence of IL-6 was observed with 180 minutes. Reduced levels of GM-CSF in the first hour of life were related to hypothermia on admission to the neonatal unit (p=0.005). Conclusion: The detection of levels of cytokines in samples collected on filter paper showed to be viable in the first few hours of life with the following advantages: ease of collection, storage / transport and the use of small volumes. IFN-γ and TNF-α and IL-6 may be considered promising markers for the development of sepsis in this population. The reduction of levels of GM-CSF in hypothermic patients favoring neutropenia alerts the need for preventive care of this condition. (AU)

Uso de tonometria arterial periférica - hiperemia reativa e biomarcadores séricos para predição prognóstica na sepse / Use of reactive hyperemia - peripheral arterial tonometry and circulating biological markers to predict outcomes in sepsis

RESUMO Objetivo: Avaliar a utilidade e o valor prognóstico da tonometria arterial periférica - hiperemia reativa em pacientes com sepse, e investigar a associação dos resultados deste exame com os níveis séricos de algumas moléculas inflamatórias. Métodos: Estudo prospectivo, realizado em uma unidade de terapia intensiva para pacientes adultos com 18 leitos. Os critérios de exclusão foram imunossupressão grave ou tratamento com antibióticos iniciado mais de 48 horas antes da avaliação. Aplicamos o exame de tonometria arterial periférica - hiperemia reativa quando da inclusão (dia 1) e no dia 3. Avaliamos os níveis de interleucina 6, interleucina 10, proteínas do grupo 1 de mobilidade alta e de ST2 solúvel no sangue obtido quando da inclusão. Resultados: Dos 79 pacientes incluídos, 17 (21,6%) tiveram os sinais da tonometria arterial periférica - hiperemia reativa considerados tecnicamente não confiáveis, tendo sido excluídos do estudo. Assim, incluímos na análise final 62 pacientes, que foram submetidos a 95 exames de tonometria arterial periférica - hiperemia reativa dentro das primeiras 48 horas após sua inclusão. A média de idade foi de 51,5 (DP: 18,9), e 49 (62%) dos pacientes eram do sexo masculino. Os índices de hiperemia reativa dos dias 1 e 3 não se associaram com necessidade de vasopressores, SOFA, APACHE II ou mortalidade aos 28 dias. Dentre os pacientes que morreram, em comparação aos sobreviventes, houve aumento significante nos índices de hiperemia reativa no dia 3 em comparação ao dia 1 (p = 0,0045). Ocorreu fraca correlação negativa entre o índice obtido por tonometria arterial periférica - hiperemia reativa no dia 1 e os níveis de proteínas do grupo 1 de mobilidade alta (r = -0,287). Conclusão: Dificuldades técnicas e falta de associações claras dos resultados do exame com a gravidade clínica e com o desfecho foram fortes limitantes da utilidade do exame de tonometria arterial periférica - hiperemia reativa em pacientes sépticos admitidos à unidade de terapia intensiva.

ABSTRACT Objective: To evaluate the usefulness and prognostic value of reactive hyperemia - peripheral arterial tonometry in patients with sepsis. Moreover, we investigated the association of reactive hyperemia - peripheral arterial tonometry results with serum levels of certain inflammatory molecules. Methods: Prospective study, conducted in an 18-bed mixed intensive care unit for adults. The exclusion criteria included severe immunosuppression or antibiotic therapy initiated more than 48 hours before assessment. We measured the reactive hyperemia - peripheral arterial tonometry on inclusion (day 1) and on day 3. Interleukin-6, interleukin-10, high-mobility group box 1 protein and soluble ST2 levels were measured in the blood obtained upon inclusion. Results: Seventeen of the 79 patients (21.6%) enrolled were determined to have reactive hyperemia - peripheral arterial tonometry signals considered technically unreliable and were excluded from the study. Thus, 62 patients were included in the final analysis, and they underwent a total of 95 reactive hyperemia - peripheral arterial tonometry exams within the first 48 hours after inclusion. The mean age was 51.5 (SD: 18.9), and 49 (62%) of the patients were male. Reactive hyperemia indexes from days 1 and 3 were not associated with vasopressor need, Sequential Organ Failure Assessment score, Acute Physiology and Chronic Health Evaluation II score, or 28-day mortality. Among the patients who died, compared with survivors, there was a significant increase in the day 3 reactive hyperemia index compared with day 1 (p = 0.045). There was a weak negative correlation between the day 1 reactive hyperemia - peripheral arterial tonometry index and the levels of high-mobility group box 1 protein (r = -0.287). Conclusion: Technical difficulties and the lack of clear associations between the exam results and clinical severity or outcomes strongly limits the utility of reactive hyperemia - peripheral arterial tonometry in septic patients admitted to the intensive care unit.

IL33 in rheumatoid arthritis: potential contribution to pathogenesis / Ação da IL33 na artrite reumatoide: contribuição para a fisiopatalogia

ABSTRACT A better understanding of the inflammatory mechanisms of rheumatoid arthritis and the development of biological therapy revolutionized its treatment, enabling an interference in the synovitis – structural damage – functional disability cycle. Interleukin 33 was recently described as a new member of the interleukin-1 family, whose common feature is its pro-inflammatory activity. Its involvement in the pathogenesis of a variety of diseases, including autoimmune diseases, raises the interest in the possible relationship with rheumatoid arthritis. Its action has been evaluated in experimental models of arthritis as well as in serum, synovial fluid and membrane of patients with rheumatoid arthritis. It has been shown that the administration of interleukin-33 exacerbates collagen-induced arthritis in experimental models, and a positive correlation between cytokine concentrations in serum and synovial fluid of patients with rheumatoid arthritis and disease activity was found. This review discusses evidence for the role of interleukin-33 with a focus on rheumatoid arthritis.

RESUMO A melhor compreensão dos mecanismos inflamatórios da artrite reumatoide e o desenvolvimento da terapia biológica revolucionaram o tratamento da doença, permitindo uma interferência no ciclo sinovite–dano estrutural–incapacidade funcional. A interleucina 33 foi recentemente descrita como um novo membro da família da interleucina 1, cuja característica comum é a atividade pró-inflamatória. Por estar envolvida na patogênese de uma grande variedade de doenças, incluindo doenças autoimunes, a interleucina 33 começa a ser estudada na doença reumatoide. Ela tem sido avaliada em modelos experimentais de artrite, no soro, no líquido e membrana sinoviais de pacientes com artrite reumatoide. Demonstrou-se que a administração da interleucina 33 exacerba a artrite induzida por colágeno em modelos experimentais, e concentrações dessa citocina no soro e no líquido sinovial de pacientes com artrite reumatoide correlacionaram-se positivamente com a atividade da doença. Esse manuscrito apresenta a interleucina 33 e discute as evidências do seu papel em diferentes doenças, com ênfase na artrite reumatoide.

Clotting Factor XIII and desmopressin improve hemostasis in uncontrolled bleeding

PURPOSE: To investigate hemostatic effects of supplementary factor XIII and desmopressin (DDAVP) in resuscitation of uncontrolled bleeding. METHODS: Fifty-four rabbits were randomized in nine groups: G1: Sham; G2: FXIII and normotensive resuscitation (NBP); G3: FXIII and permissive hypotension (PH) (MAP 60% baseline); G4: FXIII/DDAVP/NBP; G5: FXIII/DDAVP/PH; G6: NBP only; G7: FXIII no hemorrhage; G8: FXIII/DDAVP no hemorrhage; G9: PH only. Thromboelastometry and intra-abdominal blood loss were assessed. Scanning electron microscopy (EM) of the clots was performed. RESULTS: Compared to Sham, only G8 (FXIII/DDAVP w/o hemorrhage) showed clotting time (CT) significantly lower (p<0.05). NBP alone (G6) resulted in significantly prolonged CT compared to G2, G3 and G5 (p<0.05). Similarly, median alpha angle was significantly larger in G3,4,5, and 9 compared to G6 (p<0.05). Area under the curve was significantly greater in G5 than G2. Intra-abdominal blood loss was lower in G5 and G9 compared to G2 and G6. FXIII/DDAVP and PH resulted in more robust fibrin mesh by EM. CONCLUSIONS: Normotensive resuscitation provokes more bleeding and worsens coagulation compared to pH, that is partially reversed by factor XIII and desmopressin. FXIII and DDAVP can synergistically improve coagulation. Permissive hypotension reduces bleeding regardless of those agents. .

Tratamento de efluente sintético de laticínio em reatores em batelada inoculados com Aspergillus niger AN400 / Treatment of synthetic dairy wastewater in batch reactors inoculated with Aspergillus niger AN400

Indústrias de laticínios contêm elevada concentração de matéria orgânica que podem causar poluição. Este trabalho propôs estudar a remoção de matéria orgânica e de nutrientes de um efluente sintético de laticínio, disposto em reatores em bateladas repetidas inoculados com Aspergillus niger AN400. O sistema foi composto por reatores com diferentes configurações e, para cada tipo de montagem, variou-se o material-suporte. O estudo foi realizado em quatro ciclos de cinco dias, com retiradas diárias de alíquotas. A análise dos resultados mostrou eficiência de remoção de demanda química de oxigênio com picos de até 71,7%, concluindo-se que a tecnologia mostrou-se viável na remoção de matéria orgânica. Em relação aos nutrientes, o sistema pôde remover satisfatoriamente nitrato; contudo, para remoção de amônia, não se apresentou promissor.

Dairy industries contain high concentration of organic matter that may cause pollution. This study proposed to study the removal of organic matter and nutrients from a synthetic dairy effluent, arranged in repeated batch reactors inoculated with Aspergillus niger AN400. The system was composed of reactors with different configurations and, for each type of assembly, the support material was varied. The study was conducted in four cycles of five days, with daily withdrawals of portions. The results showed efficiency of removal of chemical oxygen demand with peaks of up to 71.7%. One might conclude that the technology was feasible in the removal of organic matter. For nutrients, the system could successfully remove nitrate; however, for removal of ammonia, it was not promising.

Azo dye degradation by Phanerochaete chrysosporium in the medium enriched with nitrogen in the presence of primary co-substrate

This work sought to evaluate the ability of fungi Phanerochaete chryosporium to degrade congo red azo dye in batch reactor, evaluate the influence of glucose and wheat bran as co-substrates on the removal of the dye in the medium and investigate the influence of ammonium chloride, ammonium nitrate and ammonium sulfate as the inorganic nitrogen source for the process. Wheat bran was not effective satisfactorily for the removal of dye and organic matter had no desired effect for the removal of color and organic matter and showed the lowest values of k2, 0.008 M-1.d-1and 0.0004 M-1.d-1, respectively. Glucose presented the best response with the highest final percentage of dye removal (97%) and rate of dye removal (0.017 M-1.d-1), without adding an external source of nitrogen.

Zimography is an effective method for detection of matrix metalloproteinase 2 (MMP-2) activity in cultured human fibroblasts

PURPOSE: To describe a method to characterize the gelatinase activity of cultured human periodontal fibroblasts stimulated with Pam3Cys and E. coli LPS, ligands of TLR2 and TLR4 respectively, and by centrifugation of the cultures, simulating an orthodontic force. METHODS: To study MMP-2 activity, primary cultures of human periodontal fibroblasts were stimulated with the addition of TLRs 2 and 4 ligands and the application of mechanical force by centrifugation at 141 x g for 30 min. Supernatant media was collected 24 hours later to perform protein quantification and zymography. RESULTS: MMP-2 activity suffered an increase in cultures co-stimulated with TLRs 2 and 4 ligands alone or with the presence of mechanical force application compared to basal levels. CONCLUSION: Zymography, one of the several methods to study MMPs activities, is a simple, qualitative and efficient method based on electrophoresis of bis-acrylamide gels copolymerized with a protein substrate.

Transplante de células da medula óssea na insuficiência cardíaca chagásica: relato da primeira experiência humana / Bone marrow cell transplantation in chagas' disease heart failure: report of the first human experience / Transplante de células de la médula ósea en la insuficiencia cardíaca de la enfermedad de chagas: relato de la Primera Experiencia Humana

FUNDAMENTO: Insuficiência cardíaca (IC) causada por Doença de Chagas (DC) é uma cardiomiopatia inflamatória progressiva que afeta milhões de pessoas na América Latina. Estudos com modelos de camundongo de IC devido à DC indicam que o transplante de células mononucleares derivadas da medula óssea (TCDMO) pode reduzir a inflamação, fibrose e melhorar a função miocárdica. OBJETIVO: O propósito desse estudo foi avaliar, pela primeira vez em seres humanos, a segurança e a eficácia de TCDMO no miocárdio de pacientes com IC devido à DC. MÉTODOS: Um total de 28 pacientes com IC devido à DC (média de idade de 52,2 ± 9,9 anos) com classe funcional NYHA III e IV foram submetidos à TCDMO através de injeção coronariana. Os efeitos na fração de ejeção do ventrículo esquerdo (FEVE), capacidade funcional, qualidade de vida, arritmias e parâmetros bioquímicos, imunológicos e neuro-humorais foram avaliados. RESULTADOS: Não houve complicações diretamente relacionadas ao procedimento. A FEVE foi 20,1 ± 6,8 por cento e 28,3 ± 7,9 por cento, p < 0,03 a nível basal e 180 dias após o procedimento, respectivamente. No mesmo período, melhoras significantes foram observadas na classe funcional NYHA (3,1 ± 0,3 para 1,8 ± 0,5; p < 0,001), qualidade de vida (50,9 ± 11,7 para 25,1 ± 15,9; p < 0,001), e no teste de caminhada de seis minutos (355 ± 136 m para 437 ± 94 m; p < 0,01). Não houve alterações nos marcadores de ativação imune ou neurohormonais. Nenhuma complicação foi registrada. CONCLUSÃO: Nossos dados sugerem que a injeção intracoronariana de células derivadas da medula óssea é segura e potencialmente efetiva em pacientes com IC devido à DC. A extensão do benefício, entretanto, parece ser discreta e precisa ser confirmada em estudos clínicos maiores, randomizados, duplo-cegos, controlados com placebo.

BACKGROUND: Heart failure due to Chagas' disease (HFCD) is a progressive inflammatory cardiomyopathy that affects millions of individuals in Latin America. Studies using mice models of HFCD indicate that bone marrow mononuclear cell transplantation (BMCT) may reduce inflammation, fibrosis, and improve myocardial function. OBJECTIVE: The purpose of this study was to evaluate, for the first time in humans, the safety and efficacy of BMCT to the myocardium of patients with HFCD. METHODS: A total of 28 HFCD patients (mean age 52.2 ± 9.9 years) with NYHA class III and IV were submitted to BMCT through intracoronary injection. Effects on the left ventricle ejection fraction (LVEF), functional capacity, quality-of-life, arrhythmias, biochemical, immunological, and neuro-humoral parameters, were evaluated. RESULTS: There were no complications directly related to the procedure. LVEF was 20.1 ± 6.8 percent and 28.3 ± 7.9 percent, p < 0.03 at baseline and 180 days after the procedure, respectively. In the same period, significant improvements were observed in the NYHA class (3.1 ± 0.3 to 1.8 ± 0.5; p < 0.001), quality-of-life (50.9 ± 11.7 to 25.1 ± 15.9; p < 0.001), and in the six-minute walking test (355 ± 136 m to 437 ± 94 m; p < 0,01). There were no changes in markers of immune or neurohormonal activation. No complications were registered. CONCLUSION: Our data suggest that the intracoronary injection of BMCT is safe and potentially effective in patients with HFCD. The extent of the benefit, however, appears to be small and needs to be confirmed in a larger randomized, double blind, placebo controlled clinical trial.

FUNDAMENTO: La insuficiencia cardíaca (IC), causada por la enfermedad de Chagas (EC), es una cardiomiopatía inflamatoria progresiva que afecta a millones de personas en Latinoamérica. Estudios con modelos experimentales de IC en razón de la EC, nos indican que el transplante de células mononucleares derivadas de la médula ósea (TCMO), puede reducir la inflamación y la fibrosis, mejorando así la función miocárdica. OBJETIVO:El objetivo de este estudio fue evaluar, por primera vez en seres humanos, la seguridad y la eficacia del TCMO en el miocardio de pacientes con IC debido a la EC. MÉTODOS:Fueron estudiados un total de 28 pacientes con IC debido a la EC (con edad promedio 52,2 ± 9,9 años), en clases funcionales III y IV (NYHA), al TCMO por medio de una inyección coronaria. Se evaluaron los efectos en la fracción de eyección del ventrículo izquierdo (FEVI), capacidad funcional, calidad de vida, arritmias y parámetros bioquímicos, inmunológicos y neurohumorales. RESULTADOS:No se registraron complicaciones relacionadas directamente con el procedimiento. La FEVI pasó de 20,1 ± 6,8 por ciento para 28,3 ± 7,9 por ciento, p < 0,03, cuando se comparó con el período basal y 180 días después del procedimiento, respectivamente. En el mismo período, también se observaron mejorías en la clase funcional NYHA promedio (3,1 ± 0,3 para 1,8 ± 0,5; p < 0,001), puntuación de calidad de vida de Minnesota (50,9 ± 11,7 para 25,1 ± 15,9; p < 0,001), y en el test de esfuerzo de seis minutos (355 ± 136 m para 437 ± 94 m; p < 0,01). No hubo alteraciones en los marcadores de activación inflamatoria o neurohormonales. Ninguna complicación fue registrada. CONCLUSIÓN:Nuestros datos sugieren que la inyección intracoronaria de las células derivadas de la médula ósea es segura y potencialmente efectiva en pacientes con IC debido a la EC. La extensión del beneficio, sin embargo, parece ser discreta, y necesita ser confirmada en los ensayos clínicos randomizados, doble ciegos, controlados con placebo.

Remoção de macronutrientes de efluente da indústria de castanha de caju por uso de reator aeróbio em batelada com inóculo fúngico / Removal of macronutrients from effluent of a cashew nut industry by using a batch aerobic reactor with fungal inoculums

Foi estudada a eficiência da remoção de nitrogênio e fósforo do efluente de indústria de castanha de caju, por uso de reator aeróbio em batelada com inóculo de Aspergillus niger AN400. O reator recebeu 5 L de água residuária, acrescida de glicose, na concentração de 1 g.L-1 (Etapa I) e de 5 g.L-1 (Etapa II ). Cada etapa teve seis ciclos operacionais, cada um com tempo de reação total de sete dias. Os valores de pH dos efluentes na Etapa I variaram de 6,4 a 8,7 e na Etapa II , de 3,1 a 7,0. Durante a Etapa II , o reator alcançou bons resultados para remoção de nutrientes sem acúmulo de sua concentração no meio: 49 por cento de fósforo total, 60 por cento de ortofosfato, 79 por cento de amônia, 78 por cento de nitrato e 90 por cento de nitrito, indicando que a menor liberação de nutrientes pelos micro-organismos ocorreu na presença de concentração elevada de glicose.

It was studied the removal efficiency of nitrogen and phosphorus from effluent of a cashew nut industry by using an aerobic reactor operated in repetitive batch, inoculated with Aspergillus niger AN400. The reactor was fed with 5 L of wastewater, supplemented with glucose in the concentration of 1 g.L-1 (Phase I) and 5 g.L-1 (Phase II ). Each phase had six operational cycles, with total reaction time of seven days per cycle. The pH values of the effluents in Phase I varied from 6.4 to 8.7 and in Phase II , it varied from 3.1 to 7.0. The reactor achieved good results of removal without nutrients accumulated in the medium, during Phase II : 49 percent to total phosphorus, 60 percent to orthophosphate, 79 percent to ammonia, 78 percent to nitrate, and 90 percent to nitrite, indicating that the lesser release of nutrients by microorganisms occurred in the presence of higher glucose concentration.

Resultados iniciais do transplante de células de medula óssea para o miocárdio de pacientes com insuficiência cardíaca de etiologia chagásica / Early results of bone marrow cell transplantation to the myocardium of patients with heart failure due to chagas disease

OBJETIVO: Avaliar efeitos precoces do transplante de células de medula óssea para o miocárdio de pacientes com insuficiência cardíaca (IC) de etiologia chagásica. MÉTODOS: A amostra consistiu de 28 pacientes, idade média 52,2±9,9 anos, 24 masculinos, 25 em classe NYHA III e 3 em NYHA IV, apesar de tratamento otimizado. O procedimento consistiu na aspiração de 50ml de medula óssea, separação da fração mononuclear e injeção intracoronariana. Foram avaliados os efeitos sobre a fração de ejeção ventricular esquerda (FEVE), distância no teste de 6 minutos, qualidade de vida, classe NYHA, efeitos arritmogênicos e bioquímicos. RESULTADOS: Não houve complicações relacionadas diretamente ao procedimento. A fração de ejeção ventricular esquerda em repouso antes do transplante era 20,1±6,8 por cento e, após 60 dias, aumentou para 23,0±9,0 por cento, p = 0,02. Houve melhora da classe NYHA (3,1±0,3 para 1,8±0,5; p<0.0001); qualidade de vida (50,9±11,7 para 21,8±13,4; p<0.0001); distância caminhada (355±136 m para 443±110 m; p = 0,003). O número de extrassístoles ventriculares em 24h apresentou tendência à elevação (5.322±4.977 para 7.441±7.955; p = 0,062), porém sem incremento dos episódios de taquicardia ventricular (61±127 para 54±127; p = 0,27). CONCLUSÃO: Nossos dados demonstram que a injeção intracoro¡nariana de células mononucleares da medula óssea é exeqüível e sugere ser potencialmente segura e eficaz em pacientes com IC de etiologia chagásica.